小動(dòng)物活體成像的實(shí)驗(yàn)及標(biāo)記技術(shù)分類(lèi)
更新時(shí)間:2022-04-27 點(diǎn)擊次數(shù):1379
小動(dòng)物活體成像的實(shí)驗(yàn)主要分為兩大類(lèi),一種是看腫瘤或者炎癥的發(fā)展以及腫瘤的轉(zhuǎn)移。一種是看物質(zhì)在小鼠體內(nèi)的代謝和聚集情況。比如藥物代謝,基本上是要看不同的時(shí)間內(nèi),注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的藥物到了小鼠的哪個(gè)部分的器官以及量的多少。
那么如果單純是細(xì)胞或者是藥物,我們本身是無(wú)法看見(jiàn)的。這就牽扯到,我們需要用到一些,可以被影像設(shè)備捕捉到的發(fā)光物質(zhì),對(duì)細(xì)胞或者藥物進(jìn)行標(biāo)記。從而指示細(xì)胞或者藥物在小鼠中存在的位置。
小動(dòng)物活體標(biāo)記技術(shù)主要分為兩種,一種是生物發(fā)光,一種是熒光。生物發(fā)光是通過(guò)熒光素酶(Luciferase)基因標(biāo)記細(xì)胞或者DNA。在拍照前注射進(jìn)底物,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行自發(fā)光。這種方法,不需要激發(fā)光,具有特異性強(qiáng),背景低等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是,信號(hào)太弱,需要比較長(zhǎng)的曝光時(shí)間,以及比較好的設(shè)備。
熒光的主要采用報(bào)告基因(GFP,YFP,RFP)等。需要不同顏色的激發(fā)光源進(jìn)行激發(fā),并且在信號(hào)進(jìn)行接收之前,要通過(guò)相對(duì)應(yīng)的發(fā)射濾光片將雜光進(jìn)行過(guò)濾,盡可能只是將激發(fā)信號(hào)放進(jìn)來(lái)。GFP藍(lán)光激發(fā),顯綠色,YFP綠光激發(fā)顯黃顏色,RFP黃光激發(fā)顯示紅色。所以舉個(gè)例子,GFP就需要藍(lán)色光源激發(fā),需要綠色濾光片進(jìn)行過(guò)濾。
除此之外在藥物代謝實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常用到的一些熒光染料,用于對(duì)藥物進(jìn)行標(biāo)記。我們可以很容易的在網(wǎng)上查到這些染料的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)。